DT40鸡淋巴瘤细胞 是Hyline SC鸡法氏囊淋巴细胞株经鸟类白血病病毒诱导建株的细胞系。原始淋巴瘤用罗氏相关病毒1(RAV-1)感染出生1天的小鸡得到，法氏囊中生成的肿瘤制成细胞悬液后通过静脉注射输入同基因型的受体小鸡。经过一次体内移植后，建立了DT40细胞。DT40细胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表达的c-myc RNA水平较高。DT40细胞缺少一个正常c-myc基因，但含有两个拷贝ALV去调控的myc基因。DT40细胞保留了重排免疫球蛋白轻链基因(IgL)的能力。在IgL位点，DT40包含一个重排和一个胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40细胞中都能诱导组织相容性(MHC)Ⅱ类抗原表达。v-rel诱导的MHCⅡ表达比c-rel诱导快，且其有效性在数周后达到c-rel的50倍。DT40细胞呈淋巴母细胞表型;传染性检测表明，DT40细胞释放低水平的传染性RAV-1.DT40细胞株可以用于稳转研究。
种属：鸡
年龄(性别)1日龄
组织来源：法氏囊，淋巴瘤
生长特性：悬浮
细胞形态：淋巴母细胞样
生长培养基DMEM高糖+0.05mM β-mercaptoethanol+10% Tryptose Phosphate Broth+5% Chicken Serum+10% FBS+1% P/S
培养条件气相：空气，95%;CO2.5%温度：37℃
细胞处理：
1)冻存细胞的复苏：
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2)细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL)，置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.
2.1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
